动物卤代烃中毒顶空色谱分析及体内含量分布
胡春华 刘耀 白燕平 刘克林 于忠山
(公安部第二研究所 100038)

提要：本文通过动物实验，介绍五种低碳卤代烃(CH2Cl2，CCl4，CHCl3，C2H4Cl2， C2HCl3 )中毒的顶空色谱分析及体内含量分布，建立了一种可靠、快速、实用、灵敏的中毒案件的顶空色谱检验方法。回收率>80%，变异系数0.5-6.9%，标准偏差(mg/ml)0.004-0.059，检测限(l/ml)1-20。
关键词：顶空色谱分析，低碳卤代烃，内标定量，动物实验。

一、实验
1. 仪器和试剂
    SIGMA 2B 气相色谱仪和HS-6型顶空进样装置(均为美国P-E公司)；CR-3A微处理机(日本岛津公司)全部试剂均为分析纯(天津化学试剂二厂产)
2. 顶空色谱条件
    进样口温度 100℃，FID温度 150℃，毛细柱SE-54 25m0.25mm0.25μm，柱恒温 70℃， 样品温度 80℃，样品保温时间 20-25min，进样增压时间 5sec， 分流比 10:1，N2 124 KPa，H2 138KPa，Air 207kpa。
3. 样品制备
(1) 标准样品(V/V)
a. 浓混合标准液 CH2Cl2：CCl4：CHCl3：C2H4Cl2：C2HCl3（0.5：1.5：1：0.5 ：1.5）
b. 内标溶液 C2H4Cl2：CH3OH （0.4：100）
c. 稀混合标准液 浓混合标准液：甲醇 （1：25）
(2) 对照样品
a. 阴性对照样 0.5g空白脏器(肝)加25l甲醇，再加0.5ml 10％KAl(SO4)2
b. 阳性对照样 0.5g空白脏器(肝)加25l稀混合标准液，再加0.5ml 10％KAl(SO4)2
(3) 待测样品
       准确称取0.500g中毒死亡兔各脏器(包括体液)，各加25l内标溶液，再各加0.5ml 10％KAl(SO4)2。
4. 回收率的测定
       称取0.5g空白肝，加0.5ml 10％ KAl(SO4)2，再加25l稀混合标准液，混匀后做肝中回收率(n=4) (图1)，数据见表1：

5. 线性关系、检测限的测定
分别取稀混合标准液0.2、0.4、0.8、1.0、2.0l，各加10％ KAl(SO4)2的水溶液至 1ml，以C2H4Cl2为内标测得曲线如下：

检测限分别为CH2Cl2 1g/ml， CHCl3 1.5g/ml，CCl4 20g/ml，C2HCl3 20g/ml。

6. 动物实验
2kg的灰兔空腹16小时后，灌服混合卤代烃(CH2Cl2： CHCl3：C2H4Cl2：C2HCl3 =
5：5：5：10)约25ml，5分钟后灰兔侧卧倒下，10分钟后嚎叫急喘，30分钟后喘粗气 流涎，约1小时后死亡。立即解剖以CCl4为内标，测试各脏器各卤代烃的含量分布见表-2

二、案例
    四川自贡市十六条船逆水捕鱼，途经两个废水废气排放口时，渔民均感到胸闷、头昏，行在最后的四条船上的渔民昏倒落入水中，造成三人死亡，一人经抢救脱险，同时死亡多只鱼鹰，据调查有两家排放带芳香回甜味的卤代烃类废水。收案后使用了两种顶空色谱仪、两种柱子、在不同条件下进行定性定量分析，结果解决了两家的纠纷和渔民致死原因。见图-3和图-4（条件②部分图）和表-3
色谱条件：① Sigma2B GC-FID 带HS-6顶空进样器（美PE公司），CR-6A色谱数据处理（日本岛津公司）。自装玻璃填充柱60-80目的Tenax (2m×2.6mm)，柱温170℃、进样口温220℃、 检测器温250℃，瓶温70℃、瓶保温时间20min、充压进样时间1min，氮气35ml/min、氢气30ml/min、空气400ml/min。

② HP-5890A GC-FID 带HP-19395A顶空进样器和HP-3396色谱数据处理（美HP公司）。自装不锈钢柱内装60-80目的Porapak Q (2m×2mm), 柱温195℃、进样口温220℃、 检测器温250℃，瓶温70℃、瓶保温时间20min、加压1.5bar、加压时间10s、进样时间5min、排空时间5s、阀管路温90℃，氮气30ml/min、氢气30ml/min、空气300ml/min。