高效液相色谱法测定动物组织中四环素族抗生素残留
胡海山 万春花 龙洲雄
(江西省分析测试研究所 南昌 330029)

      四环素类药物属广谱抗生素，但在发挥药效的同时对人体有较大的毒副作用，目前四环素类抗生素的含量测定方法有微生物法[1]、高效毛细管区带电泳法[2]、薄层色谱法[3] 及高效液相色谱法[4-6]等。本实验选择独特的样品处理方法，建立了一种快速、准确、分离度好的高效液相色谱法。
1 实验部分
1.1 仪器色谱条件
    美国Waters高效液相色谱仪，色谱柱：Kromasil C18柱(250×4.6mm, 5μm)；流动相：A泵乙腈-水（60/40，V/V)；B泵0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（用30%硝酸溶液调节至pH=3），在15min内恒定为27：73(A：B)，在15～17min变为40：60，恒定8min；流速：1.0ml/min；柱温：室温；检测波长：355nm；进样量：20μL。
1.2 样品预处理
    将动物组织解冻，匀质，准确称取5.00g(±0.01g) 置于50ml具塞三角瓶中，加入5%的高氯酸溶液25ml，于超声波振荡器上振摇20min。以3000r／min高速离心5min，取上清液，经0.45μm滤膜过滤，滤液上机备用。

2 实验结论
    本实验四环素族抗生素的相对标准偏差（RSD）在1.40%～1.50%之间，平均回收率分别为：土霉素96.73%、四环素96.4%、金霉素97.7%。样品处理时间＜20min，分析时间为23min。适合于常规的动物组织样品的快速测定，可广泛推广于各动物源食品企业作为常规检测的方法。
参考文献
1. 袁军，刘玉萍，陈广金等.蜂胶中四环素族抗生素残留的测定.现代商检科技.1998，8（3）：21-23.
2. 祝仕清，牛长群，张惠敏.高效毛细管电泳分离四环素类抗生素及测定四环素中杂质.药物分析杂志，1998，18（4）：248-250.
3. 张启华.蜂蜜中四环素族抗生素残留的薄层色谱测定法.分析测试学报.1998，17（4）：54-56.
4. 陈毓方.肌肉组织中四环素类抗生素的固相萃取-液相色谱法测定.分析测试学报，2003.5,3(22):97-99.
5. 王蕾，徐智秀，张孝松等反相高效液相色谱法快速测定7种四环素类抗生素.分析化学，2003.1，1：52-54.
6. 中华人民共和国国家标准.GB5009.116-2003.畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定（高效液相色谱法）[M]. 北京：中国标准出版社，2004.77～80.
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