在线推扫毛细管电泳法测定马钱子碱药材中
士的宁和马钱子碱含量
韩丹丹 王春 王志 臧晓欢
河北农业大学理学院，保定071001

    马钱子是马钱科植物马钱的干燥成熟种子，具有通络止痛、清结散肿的功效，是一种中枢神经兴奋药物，可用于治疗偏瘫和局部止痛，其有效成分主要是马钱子碱和士的宁，它们是两种有毒的生物碱，因其有效剂量与中毒剂量非常接近，易发生中毒，所以建立灵敏、准确的测定马钱子碱、士的宁含量的分析方法具有重要意义。
    目前测定马钱子碱、士的宁的方法主要有HPLC[1]、GC[2]、1HNMR[3]等。毛细管电泳法（CE）因其分离效率高、分析时间短、耗样量少、运行成本低等优点，近年来在中药分析领域得到了广泛应用，但缺点是采用通用的紫外检测器时灵敏度低。在线富集技术是提高CE灵敏度的一种简便易行且行之有效的方法[4-9]，本文首次报道了采用在线推扫富集毛细管电泳法测定马钱子中马钱子碱、士的宁含量的新方法。

1 仪器与试剂

    Beckman P/ACE MDQ型毛细管电泳仪（美国Beckman公司，二极管阵列紫外检测器），未涂层熔融石英毛细管柱（内径75 μm，总长50 cm，有效长度40 cm，河北永年光导纤维厂），数据采集与处理由32 Karat Software Version 7.0完成。PHS-3C型数字酸度计（杭州东星仪器设备厂），TG16-II型台式高速离心机（长沙平凡仪器仪表有限公司），Sartorius BS 224S型电子分析天平(北京塞多利斯天平有限公司)。
    马钱子、士的宁混合对照品溶液浓度为1.0 mg/mL（用乙醇定容），内标小檗碱配成1.0 mg/mL水溶液，使用前用100 mmol/mL H3PO4（pH=2.0）稀释。

2 实验方法和结果

2.1 测定条件：经优化后，运行缓冲溶液为50 mmol/mLH3PO4（pH=2.0），100 mmol/mL SDS, 20%乙腈（v/v）。0.5 psi进样270s, 运行电压-20 kV，温度20℃ 。
2.2 线性范围：按选定方法测定，所得士的宁峰面积与内标小檗碱峰面积的比值（Y1）, 马钱子碱峰面积与内标峰面积的比值（Y2），分别与士的宁的浓度（X1）、马钱子碱的浓度（X2）（μg/ mL）作图，做回归处理，线性范围均为0.5-15.0 μg/mL。回归方程分别为：Y1 = 0.0528+0.6831 X1（r = 0.998）和Y2 = -0.0126+0.5817 X2（r = 0.996）。
2.3 样品溶液制备：0.5 g 马钱子细粉（80目）加50 mL水超声2h, 过滤，取滤液1.0 mL至100 mL容量瓶，用100 mmol/mLH3PO4（pH=2.0）定容至刻度，进样测定。样品的电泳图如图1所示。

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图1 马钱子样品毛细管电泳图
1内标小檗碱，2士的宁，3马钱子碱

参 考 文 献

1. Wang, Z. H.; Zhao, J. Z.; Xing, J. B.; He, Y. and Guo, D. A., Journal of analytical toxicology 2004, 28: 141-144.
2. Akira I.; Ideki H.; Hiroshi S.; Takeshi K. and Osamu S., J. Forensic Sci. 40(3): 483-485.
3. Frederich M.; Choi Y.H.; Angenot L.; Harnischfeger G. and Lefeber AWM., Phytochemistry, 2004, 65(13): 1993-2001
4. Britz-McKibbin, P.; Bebault, G. M.; and Chen, D. D. Y., Anal. Chem. 2000,72: 1729-1735.
5. Britz-McKibbin, P.; and Chen, D. D. Y., Anal. Chem. 2000,72: 1242-1252.
6. Chiang, H. Y.; and Sheu, S. J., Electrophoresis 2004,25: 670-676.
7. Han, H. J.; Chun, M. S.; Riaz, A.; and Chung, D. S., Electrophoresis 2005, 26: 480-486.
8. Quirino, J. P.; Kim, J. B.; and Terabe, S., J. Chromatogr. A 2002, 965: 357-373.
9. Quirino, J. P.; and Terabe, S., Science 1998, 282: 465-468.