毛细管气相色谱法测定稻谷中13种
有机磷和菊酯类农药的残留量
赵煜，金玉棋，杨宏兴，高斯祺
（云南省农业环境保护监测站，云南　昆明　650034）

    有机磷和菊酯类农药是广谱性杀虫剂,广泛用于稻谷病虫害的防治,在国家标准GB2763-2005《食品中农药最大残留限量》中规定了稻谷中甲胺磷≤0.1mg/kg、甲基对硫磷≤0.1mg/kg、百菌清≤0.2mg/kg、三唑酮≤0.5mg/kg。同时, 标准也推荐了检测方法，如甲胺磷GB/T5009.103，甲基对硫磷GB/T5009.20等，由于方法各异，费工、费时、费溶剂。本文采用乙腈提取，经净化，建立了稻谷中甲胺磷、乐果、甲拌磷、氧化乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯13种有机磷和菊酯类农药多残留的气相色谱快速测定方法，该法快速、准确、灵敏，在实际检测中应用良好。
1　实验部分
1.1　仪器
    Agilent 6890N气相色谱仪（FPD火焰光度检测器，Agilent 7683自动进样器）；Agilent 6890N气相色谱仪（μECD微电子捕获检测器，Agilent 7683自动进样器）；高速组织分散机　T18 Basic（IKA公司）；氮吹仪（美国Organomation Associates N-EVAP 112)；电子天平　JJ500（精确到0.01g、常熟双杰测试仪器厂）H－1微型混合器（上海彭氏实业有限公司）。
1.2　试剂与材料
    试剂（除注明外，均为分析纯）：乙腈；正已烷；丙酮；氯化钠（分析纯），140℃烘4小时。
固相萃取柱，弗罗里矽柱（安捷伦公司Florisil柱，容积6mL，填充物1000mg )；有机系针头滤器（φ0.22μm，先德科技仪器有限公司）。
    标准物质：甲胺磷、乐果、甲拌磷、氧化乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯浓度均为1000μg/ml，向农业部环境保护科研监测所购买。
1.3　农药标准溶液的配制
    将1000μg/ml的标液根据需要逐级稀释，配成工作使用液。
1.４　色谱分析条件
（1）色谱柱：
    有机磷类（甲胺磷、乐果、甲拌磷、氧化乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷）用50％聚苯基甲基硅氧烷（DB-17或HP-17）柱，60m×0.53mm×1.0μm；菊酯类（百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯）用100％聚甲基硅氧烷（DB-1或HP-1）柱，30m×0.25mm×0.25μm。
（2）色谱条件
    有机磷类：进样口温度：220℃；检测器温度：250℃；柱温: 150℃(保持2min)8℃/min250℃(保持12min)。载气：氮气，纯度≥99.999％,恒流10mL/min；燃气:氢气, 纯度≥99.999％,流速为75mL/min；助燃气:空气, 流速为100mL/min；进样方式：不分流进样。
    菊酯类:进样口温度：200℃；检测器温度：320℃；柱温:150℃(保持2min)6℃/min270℃(保持25min)；载气：氮气，纯度≥99.999％,恒压21.0Psi；进样方式：分流进样,分流比1+10。
２　实验步骤
２.１　样品的提取：
    取过20目制备好的稻谷样品20.00g，置于匀浆机瓶中，加入20mL蒸馏水，轻轻震摇让水与稻谷样品充分混匀，加入监测农药组分（加标浓度为0.01mg/L、 0.05mg/L、0.5mg/L两个水平），盖上瓶塞，放置30分钟，再加入50mL乙腈，在高速组织分散机匀浆2.0分钟，滤入内装有7～15克（经灼烧过）氯化钠的100mL具塞量桶中，盖上塞子，剧烈振摇1分钟，保证有固体氯化钠存在，静置10分钟分层，分别取有机相层10.00mL滤液两份于小烧杯中，贴上小标签表明一份用做有机磷检测,一份用做菊酯类检测。之后将取出的滤液置于通风柜中75-78℃水浴上氮吹近干。
2．2样品的净化：
    有机磷：在氮吹近干的小烧杯中加入1mL丙酮溶解样品，并将其转移至15mL刻度离心管中，再用约3mL丙酮分3次冲洗烧杯，转移至刻度离心管中，最后准确定容至4.0mL,在旋涡混合器上混匀,过0.22μm滤膜，装瓶，供气谱测定。
菊酯类：在氮吹近干的小烧杯中加入2mL正己烷溶解样品，并将其倒入已依次用5mL10％丙酮+正已烷、5mL正已烷预淋条件化的弗罗里矽柱中，用15mL刻度离心管接收洗脱液，待液面到达柱吸附层表面时，分别用5mL10％丙酮+正已烷清洗烧杯淋洗弗罗里矽柱三次。将收集洗脱液的刻度离心管置于氮吹仪上，在约40℃水浴上氮吹蒸发至4mL以下，用正已烷准确定容至4.0mL，在旋涡混合器上混匀，装瓶，供气谱测定。
3　结果与讨论
3.1色谱分离情况
在选定的色谱条件下，待测组分得到良好分离，完全满足实际样品检测的需要。

甲胺磷(6.764min);甲拌磷(12.658min);氧化乐果(13.125min);乐果(15.103min);甲基对硫磷(16.636min);毒死蜱(17.273min); 对硫磷(17.546min)。
图1稻谷添加实验中有机磷类的色谱图(0.1mg/kg水平)

百菌清（9.129min）；三唑酮（12.420min）；甲氰菊酯（19.710min）；三氟氯氰菊酯（21.292min）；氯氰菊酯（24.233、24.445、24.636、24.717min）；氰戊菊酯（26.768、27.070min）。
图2稻谷添加实验中菊酯类的色谱图(0.1mg/kg水平)
3.2精密度和准确度
    以回收率表示方法的准确度, 以相对标准偏差(RSD)表示方法的精密度,在稻谷的添加回收率实验中，做了0.01mg/L、0.05mg/L、0.5mg/L三个水平各5个平行样，回收率和相对标准偏差见下表。根据三倍信噪比，获得该方法的检出限。

添加回收率及方法检出限

2.2　线性关系
用方法所确定的检测条件，对质量浓度为0.01～5.0mg/L 的甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、乐果、甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、氰戊菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯标准溶液进行测定，以响应值(A)对应的质量浓度(C)进行线性回归，其相关系数见上表。
2.3 讨论
本方法在前处理上作了进一步改进, 简化了前处理繁琐的过程，缩短了分析时间，一次可稳定获得多个农药组分较高的回收率，特别是菊酯类农药前处理采用固相萃取柱净化,大大降低了背景噪音干扰。由线性实验、样品测定、回收率实验结果表明该方法测定稻谷中甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、乐果、甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、氰戊菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯准确可靠 ，检出限符合国家标准要求，完全能满足实际样品检测的需要。

参考文献：
〔1〕 食品中农药最大残留限量GB2763－2005
〔2〕 买光熙，刘萧威等.毛细管色谱法同时定平果 梨中氯氰菊酯 联苯菊酯和氟氯氰菊酯的残留量.农业环境保护,2002,21(3):260-262,275
〔3〕 Commission Decision 93/256/EEC,Laying down the methods for detdcting residues of substances having a hormonal or thyrostatic〔J〕，OJ.No.118，14.4.1993
〔4〕 杨祖英，食品检验〔M〕，北京：化学工业出版社2001.
〔5〕 食品卫生了国家标准汇编GB/T 5009.146－2003〔S〕
〔6〕 中华人民共和国农业行业标准NY/T 761－2004〔S〕
〔7〕 食品中农药残留分析文摘---安捷伦科技

determination of thirteen pesticides of pyrethroid and organophosphates in rice by Capillary Gas Chromatography
Zhao Yu,Jin Yu-Qi, Yang Hong-Xing，Gao Si Qi
(Agro-environmental Protection & monitoring Center , Yunnan province Kunming650034)

Abstract: A method with acetonitrile extraction and solid phase extraction （SPE）techique for determination for thirteen pesticides of pyrethroid and organophosphates（OP）,such as Methamidaphos、Dimethoate、Dimethoate、Triadimefon and Fenpropathrin in rice by capillary gas chromatography.The concentrations of the recover experiment were 0.01mg/Kg、0.05mg/Kg and 0.5mg/Kg.The recovers were 68.5%～118.8% and with RSD 2.4%～19.6%. The method is rapid、sensitive accurate and suitable for the analysis of pesticide residues.
Key words: capillary gas chromatography；pyrethroid；organophosphates；residue