高效液相色谱法测定中药材中蜕皮甾酮的含量
吴红京
（中国科学院福建物质结构研究所 福州 350002 ）
段建平
（福州大学测试中心 福州 350002）

     蜕皮激素包括羟基蜕皮甾酮（ecdysterone, EDS）和牛膝甾酮。其中EDS有促进蛋白质合成、抑制药物引起的血糖升高、改善肝功和降低血浆胆固醇的作用。目前已有用HPLC测定蜕皮甾酮的报道[1，2]，但我们选择的这3种中药材中的蜕皮甾酮含量的测定却很少有报道。本法以C18柱为分离柱，甲醇和水作流动相，分别测定了中药材紫背金盘、网果和金疮小草中20-羟基蜕皮甾酮的含量，方法可靠，适合多种中药材中蜕皮甾酮的测定。

1． 实验部分
1．1 仪器和主要试剂 LC-4A高效液相色谱仪，SPD-2AS紫外分光光度检测器，C-R2AS数据处理系统（日本岛津）。
甲醇（国产色谱纯），20-羟基蜕皮甾酮对照品（99%，上海），其它试剂均为AR级。
1．2 色谱条件 色谱柱：Alltima C18 (4.6×250mm, 5μm)；流动相：甲醇：水= 46：54（v/v）；流速：0.9 mL/min，检测波长：243nm；柱温：45℃。
1．3 样品的制备 中药材于60℃烘干2小时，碾粉过80目筛。称取约5克样品，置于索氏提取器中，加入150mL甲醇回流提取10小时，残渣用50mL甲醇超声波振荡30分钟，合并提取液，减压回收甲醇，用40mL蒸馏水将提取物转移至分液漏斗中，先用20mL石油醚萃取3次，弃去醚层，用水饱和，正丁醇萃取5次，体积分别为30、30、20、20、15mL, 合并正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶解后，于10mL定容。溶液经0.45μm滤膜过滤后，作HPLC分析。
2．结果与讨论
2．1 标准曲线和检测限 将用甲醇配制成50mg/L的20-羟基蜕皮甾酮对照品标准溶液，稀释成不同浓度的标准系列，分别取不同浓度的标准溶液进样，重复5次，测得峰面积，以峰面积均值与浓度作图，绘制标准曲线，通过回归计算，求得回归方程：Y= 2.1948×10-2＋1.1050X, 相关系数r=0.9995, 测得20-羟基蜕皮甾酮最小检限在纳克级。
2．2 样品分析 将“1.3”节方法提取的样品进行HPLC分析，样品采用外标法定量，典型谱图见图1，测定结果见表1。
2．3 方法精密度和加标回收率 在5份含有脱皮甾酮的样品中分别加入已知浓度的标准溶液，按“1.3”节方法提取并进行测定，用外标法定量，考查方法精密度和加标回收率，在上述色谱条件下进行分析，计算平均回收率为95.7%。
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联系人：吴红京，福建省福州市杨桥西路155号 福建物质结构研究所 1# 501信箱
邮 编：350002 电 话：0591-83729950

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图1 20-羟基蜕皮甾酮的色谱图
a. 标准品 b. 样品
1.20-羟基蜕皮甾酮

表1 中药材中20-羟基蜕皮甾酮的测量结果 （%）n=5 

参 考 文 献
[1] 马 英，车镇涛，毕开顺，等.药学学报，2000，35（4）313-315
[2] 邱志国，迟德富. 东北林业大学学报，1997，25（5）85-86

DETERMINATION OF ECDYSTERONE FROM CHINESE MATERIA MEDICA BY HPLC
WU Hong-jing
(Center of Technology and Test, Fujian Institute of Research on the Structure of Matter,
The Chinese Academy of Sciences,Fuzhou 350002, China)