蔬菜中氨基甲酸酯类农残的HPLC测定方法
 

蔬菜中氨基甲酸酯类农残的HPLC测定方法

杨挺 皇甫伟国 王立君  

(宁波市农业科学研究院 宁波 315040)

摘要 本文研究了用乙腈提取, Waters Carbamate Analysis Column 分离,碱液水解,OPA柱后衍生,荧光检测测定蔬菜中7种氨基甲酸类杀虫剂及其3种代谢物残留量的方法。研究结果表明,方法的最低检测限为0.01mg/kg,相对标准偏差(RSD)<10%,回收率的范围是86.40%~97.00%。

关键词 高效液相色谱;柱后衍生;氨基甲酸酯类农药;残留;蔬菜

中图分类号

Determination of the Multiresidue of Carbamate Insecticides in Vegetables

by High Performance Liquid Chromatography

Yang Ting, Huanfu Weiguo, WAN Lingjun

(Ningbo Academy of Agriculture Science, Ningbo 315040, China)

Abstract  A method for the determination of multiresidue of carbamate insecticides and their metabolites in vegetables by HPLC with post-column fluorescence derivatization has been developed. The homogenated samples were extracted with acetoneitrile. 7 carbamate insecticides and their 3 metabolites were separated by Waters Cabamate Column with gradient elution,hydrolysis by NaOH solution and the reaction of the product with o-phthalaldehyde and 2-mercaptoethanol. The average spiked recoveries ranged from 86.40~ 97.00%,and the relative standard deviations were less than 10.0%. The range of limit of detection was 0.01mg/kg.

Key words  high Performance Liquid Chromatography;Post-Column Fluorescence Derivatization;Carbamate Insecticides;Residue ;Vegetable

1 引言

 

氨基甲酸酯类农药是一类高效、广谱性杀虫、杀线虫剂,自20世纪70年代以来广泛应用于粮食、蔬菜、水果及经济作物上的害虫防治。由于氨基甲酸酯类农药毒性大,在蔬菜上大量使用,形成农药残留,对公众的健康造成极大影响。常用的检测氨基甲酯酯类检测方法用气相色谱法及高效液相色谱法[1][2]。由于氨基甲酸酯类农药的热

 

 

 

收稿日期:

 

基金资助:宁波市2002年农业科技行动项目,宁波市重大农业科技计划项目(2002C1000)

作者简介:杨挺(1977-),男,硕士,主要从事农药、兽药残留分析及环境毒理学研究

不稳定性及液相色谱紫外检测器灵敏度的限制,

对于样品检测的准确性造成很大影响。本文采用

柱后衍生-荧光检测的高效液相色谱法对蔬菜的氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物进行多残留快速测定。

2 实验  

2.1 试剂和仪器 

氨基甲酸酯类农药混合标样(涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、克百威、3一羟基呋喃丹、灭虫威、灭多威、杀线威、残杀威、甲萘威等10种杀虫剂及其代谢物)SUPELCO生产,乙腈(HPLC);甲醇为(HPLC),使用前过0.45µm滤膜;氯化钠(AR),于140℃下干燥3 h;氢氧化钠(AR)、2-巯基乙醇(CP)、邻苯二甲醛(CP);水为超纯水,使用前过0.45tun滤膜。高速组织捣碎机(IKA-T25);氮吹仪(N-EVAP-111);食品加工器(PHILIPS)。  Waters 2695 HPLC,配有荧光检测器、柱后衍生装置。

2.2 样品处理   

样品制备:准确称取50.00 g粉碎好的样品置于250mL细口瓶中,加100 mL乙腈,浸置3min,转移到高速组织捣碎机中,高速匀浆1 min。将匀浆好的样品快速抽滤到200mL具塞量筒(量筒内放有10~15g NaCl)内,收集滤液后盖上塞子,剧烈振摇1 min,静置10 min,使乙腈相与水相分层。准确吸取10 mL上层乙腈相溶液,放到200 mL烧杯中,

在70℃水浴上在缓慢氮气流吹动下蒸发至近干,残渣用pH=3超纯水定容到5mL,经0.45µm滤膜过滤后进行色谱分析。   

2.3 液相色谱条件    色谱柱:Carbamate Analysis Colomn,流动相为甲醇、水和乙腈,采用梯度洗脱(梯度洗脱程序见表1),流速1.5mL/min;柱温:40℃;柱后衍生条件:碱解反应室温度为80℃,碱液流速为0.5mL/min,OPA试剂反应温度为室温,流速为0.5mL/min,荧光检测器的激发波长为339nm,发射波长为445nm,运行时间30 min。 

表1 以梯度洗脱程序

Table 1 The gradent elution program

 

3 结果与讨论

3.1 标准曲线 用pH=3的超纯水制配制成50,100,200,500µg/L的农药混合标样,测得各种农药的标准曲线线性关系良好,10种氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物的线性回归方程(x为进样量,y为峰面积)、最低检出量,最低检出浓度见表2。其中,最低检出量按S/N=3计算,最低检测限以取样50.00 g,提取总体积100mL,分取10mL,定容5 mL,进样体积为10µL计算。

 


3.2 添加回收率 对10种氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物分别在蚕豆、大白菜、甘蓝等3种蔬菜中以0.50 mg/kg添加水平进行了加标回收试验,得到了很好的结果(见图1、表3)。由图1可以看出10种氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物在Carbamate Analysis Colomn柱上得到了很好分离,没有相互干扰,符合农药多残留检测的方法要求。由表3可以看出: 10种氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物的平均回收率都在83.65%~98.24%,变异系数在10%以下,符合农药多残留检测的回收率和RSD要求。

 


图1 10种氨基甲酸酯杀虫剂及代谢产物标样(1)及蚕豆(2)、大白菜(3)、甘蓝(4)

Fig.1 Chromatograms of the mixture of 10 carbamate insecticides and their metabolites(1) and the spikes samples of Vicia faba(2)、Chinese cabbage(3)、Cabbage(4)

(1.涕灭威亚砜,2.涕灭威砜,3.杀线威,4.灭多威,5.3-羟基呋喃丹,6.涕灭威,7.残杀威,8.呋喃丹,9.甲萘威,10.灭虫威)

 

参考文献:

[1] Ballesteros E, Gallego M, White J D, Philippo E T, Elilis R L. Gas chromatographic/mass spectrometric confirmation of ten N-methylcarbamate insecticides in liver, J. AOAC Int.,1994,77:1568-1574.

 

[2] Mc Garvey B D. High performance liquid chromatographic methods for the determination of N-methylcarbamate pesticides in water, soil, plant and air,J.Chromatogr.,1993,642:89-105.

 

 

 




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