流动注射化学发光法测定金银花清除•OH的能力
                           侯冬岩 回瑞华 刘晓媛 唐蕊
                （鞍山师范学院 化学系，辽宁 鞍山 114007）

    金银花(Lonicera Similis Hemsl),为忍冬科(Caprifo1iaceae)忍冬属(Lonicera L.)植物的花蕾或初开的花[1],生于山坡、路旁灌丛或疏林中.分布北起辽宁,西至陕西,南达广西北部,西南至贵州、云南各省区[2].金银花具有清热解毒、凉散风热之功效。金银花中的黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量,使冠脉、脑血管流量增加，抗心律、软化血管、降血糖、血脂等作用，同时它还是一种天然的抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基抗衰老，增加机体免疫力的生理活性作用。本文采用邻菲罗啉—Cu+—H2O2化学发光体系，并结合流动注射技术研究金银花的清除•OH的能力。该方法具有灵敏度高，操作简单、快捷等优点，
1. 实验部分
1.1仪器与实验材料
IFFM-D型流动注射化学发光仪(西安瑞迈电子科技有限公司)；pHS-3C精密数显酸度计(上海天达仪器有限公司)；微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司)；邻菲罗啉(沈阳市试剂三厂，4.0×10-4 mol/L)，氯化亚铜(天津市化学试剂一厂，1.0×10-4 mol/L)，过氧化氢(沈阳第一试剂厂，0.27mol/L)，碳酸盐缓冲液(pH10.57)；金银花样品：采自岫岩、千山,鲜花经25℃自然干燥而成。
1.2样品处理
1.2.1用60%乙醇作溶剂：称取粉碎的金银花样品(0.425mm)1.00克，固液比1：12，超声提取时间30min，温度0℃。旋转蒸发除去乙醇，定容至50ml，即得20mg/ml的待测溶液。
1.2.2用水作溶剂：称取粉碎的金银花样品(0.425mm)1.00克，固液比1：25，提取时间30min，温度室温，过滤，定容至50ml，即得20mg/ml的待测溶液。
1.3实验条件
    按图1所示连接仪器，以水为空白，测定不同浓度金银花对HO•的清除率。
                      清除率=（I0-I）/ I0 ×100%
2.结果与讨论
    由实验可看出，金银花的60%乙醇和水的提取溶液都具有一定的清除•OH能力，测定结果如图2、图3，从图中可看出它们的IC50(清除率为50%时的溶液的浓度)分别为1.1mg/ml，2.4mg/ml，可知金银花60%乙醇的提取溶液具有更强的清除•OH能力。

参考文献：
[1] 国科学院北京植物研究所主编.中国高等植物图鉴(第四册).北京.科学出版社,1975,296,758
[2] 石钺，石任兵,陆蕴如.中国药学杂志,1999,34(11):724
[3] 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共和国药典(1990年版．一部,北京:人民卫生出版社．化学工业出版社．U90：190
[4] 苏新医学院编.中药大辞典.京：人民卫生出版社,977：1289
[5] 董杰德．山东中医学院学报,1993,17(4)：46
[6] 回瑞华,关崇新,侯冬岩.鞍山师范学院学报,2000,12(4)：87