聚苯乙烯酰乙基镍型亲合色谱材料在纯化
                     融合蛋白中的应用

                         刘晓宁 张晓晓 许琳 魏荣卿
         南京工业大学 制药与生命科学学院，南京市新模范马路5号，210009

摘要：以聚苯乙烯作为载体，氯乙酰化代替氯甲基化，制备了聚苯乙烯酰乙基苯丙氨酸-Ni2+树脂（PS-Acyl-Ni2+）。该树脂合成方法简单，并克服了氯甲基化树脂制备过程中使用致癌物氯甲醚的弊端；另外，由于酰乙基羰基可与苯丙氨酸上的氧与Ni2+形成两个五元环，使该树脂对Ni2+的螯合稳定且螯合量较高，有利于提高蛋白吸附量。本文以醛糖还原酶融合蛋白为对象，初步考察了该树脂在纯化融合蛋白中的应用。结果表明：粗酶液不经过硫酸铵沉淀、透析等预处理，直接加入3 mM咪唑进行吸附洗脱，收集50-100 mM咪唑的解离液浓缩之后，进行二次吸附洗脱，纯化倍数达到30倍，由SDS－PAGE结果表明，可得到单一条带。由此说明制备的PSPheNi2+螯合树脂可较好的纯化融合蛋白，且操作简单、周期短，在融合蛋白纯化方面具有良好的应用前景。

关键词：聚苯乙烯，聚苯乙烯酰乙基苯丙氨酸-Ni2+树脂，醛糖还原酶融合蛋白，纯化