赤霉素样品的非水毛细管电泳分离
王晓瑜 陈义*
中国科学院化学研究所,生命分析化学实验室,北京,100080
赤霉素的分析因其来源有限而受到很大的障碍,因此我们研究了样品消耗量仅纳升水平的毛细管电泳(CE)法,为了以后能够与质谱MS联用,研究的重点放在非水分离体系上。经过搜索发现醋酸氨非水缓冲体系可作电泳介质。研究中碰到的问题是,赤霉素与毛细管表面存在吸附作用,电泳所得峰形较宽且迁移时间、样品峰高的重现性都很差。为了解决这个问题,我们研究了不同的涂层,结果发现:1)聚丙烯酰胺键合涂层不仅能有效抑制电渗,而且可使淌度相近的三个赤霉素(GA3,GA4和GA7)达到基线分离,所得电泳峰的峰高和出峰时间的标准偏差<2.0%。2)PEO动态吸附涂层管也可以用(图1),分离效果略差于聚丙烯酰胺键合涂层,出峰时间和峰高的标准偏差在3.0%以内。但因缓冲溶液中的铵离子也会和PEO一起吸附到管内壁上,结果出现反向电渗,出峰速度加快,可在12分钟内完成分离。
致谢:感谢国家自然科学基金(20435030)和中国科学院(KJCX2-YW-H11)的资助。