新型氨基酸衍生化环糊精键合硅胶手性固定相
                    的合成与性能研究

                       都振华 王莉晶 孙立权 罗爱芹
               北京理工大学 生命科学与技术学院，北京 100081
                           都振华，硕士研究生

摘要：合成了N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸(BOC-L-Phe)衍生化环糊精键合硅胶手性固定相，采用X射线光电子能谱对其进行了表征，采用苯、萘、尿嘧啶为柱效测试物评价了该固定性的性能。在反向色谱条件下考察了该固定相对对映体的分离情况。对某些对映体取得了较好的分离效果。
    环糊精类高效液相色谱固定相在对映体分离中占有重要的地位，通过对环糊精的衍生化可以改变固定相的分离性能，从而使固定相表现出更好的灵活性和分离效果[1-2]。BOC-L-苯丙氨酸有一个手性中心，具有较大的疏水集团和一个苯环，可以改善环糊精空腔的外部环境，同时苯环可能与被分析物产生п-п作用。

1．实验部分
1.1 仪器与试剂
    高效液相色谱仪, Waters 515-717-996 HPLC系统，包括515二元泵,717自动进样器,996二极管阵列检测器, Empower 色谱工作站.多孔微球硅胶(日本富士硅化工有限公司),γ-(2,3-环氧丙氧基)丙基三甲氧基硅烷(KH-560)(武大有机硅新材料股份有限公司),β-环糊精(南开大学实际公司),氢化钠(华北地区特种化学试剂开发中心),BOC-L-Phe（扬州宝盛生化股份有限公司）其他试剂均为分析纯。
1.2 氨基酸衍生化环糊精键合硅胶手性固定相的合成
1.2.1 BOC-L-Phe衍生化环糊精
    称取β-环糊精1.414g，BOC-L-Phe 2.25g，混合溶于40ml DMF，移入250ml单口烧瓶中。取2gDCC溶于20ml DMF，缓慢滴入单口烧瓶。搅拌反应24h。过滤，加入足量丙酮使产物沉淀，过滤后干燥，得到BOC-L-Phe-CD。
1.2.2 键合硅胶[3]
    称取BOC-L-Phe-CD 2.5g，加50ml DMF溶解，在溶液中加入0.2g NaH，反应至无气泡产生，滤入三口烧瓶，在N2保护下加入KH-560 1.25ml，90℃反应5h后，加入2.3g活化硅胶，N2保护下110℃反应24h，过滤、洗涤、干燥后得到固定相。
1.3 色谱柱的填充
    采用湿法装柱，匀浆液为DMSO，顶替剂为甲醇，填充压力34.5MPa。

2．结果与讨论
2.1 固定相的表征
2.2.1 X射线光电子能谱表征   

    由于硅胶和BOC-L-Phe-CD相比，含C量较低，含O量较高，所以键合硅胶后C元素含量应下降，O元素含量应上升，从表一中可清楚看到元素含量变化与理论分析结果一致。证明了固定相合成的成功。
2.2　BOC-L-Phe-DC键合硅胶固定相的色谱性能测试
    以苯、萘、尿嘧啶为测试溶质，在反向条件下，评价了该柱的柱效。其中萘每米理论塔板数为32210，对称性为1.085。
2.3 手性化合物的分离
    在反向色谱条件下，采用该手性固定相，成功分离了丁溴东莨菪碱对映体。分离度达到1.75。
3．结论　
    成功地合成了BOC-L-Phe-CD键合硅胶固定相,并利用X射线光电子能谱反应进行了表征。通过对环糊精的修饰，使其对丁溴东莨菪碱表现出了良好的手性分离性能。

参考文献
[1] Armstrong D W, Li W Y,Chang C D. Polar-liquid,derivatized cyclodextrin stationary phases for the capillary gas chromatography separation of enantionmers[J]. Anal Chem, 1990, 62: 914-923.
[2]HargitaiT,OkamotoY.Evaluation of 3,5-dimethylpheylcarbamoylatedα-,β-,and γ-cyclodextrins as chiral stationary phase for HPLC [J].J LiqChromatogr,1993,16(4):843-858.
[3] Yu-Qi Feng , Ming-Jie Xie, Shi-Lu Da Preparation and characterization of an L-tyrosine-derivatized
b-cyclodextrin-bonded silica stationary phase for liquid chromatography [J] Analytica Chimica Acta 403 (2000) 187–195