小分子多肽毛细管电动及色谱分离与ESI-MS
检测新进展
陈子林
武汉大学药学院药物分析学系
现代分子生物学及病理学研究表明:活性多肽和蛋白质是癌症等疾病诊断的重要生物标记物(Biomarker),多肽及蛋白质的毛细管电动及色谱分离技术已成为是蛋白质组学及生命科学研究中的一个重要研究课题。本文将介绍本课题组在小分子多肽及蛋白质的电动及色谱分离与电喷雾离子化-质谱检测新方法研究方面所取得的一些新进展。
样品在毛细管壁上的吸附将导致分离效能下降、检测灵敏度低下等问题。因此,研究解决样品吸附问题的新途径,建立毛细管电动分离与高灵敏度的质谱检测的联用方法无疑具有极其重要的意义。本课题采用了一种高分子线性聚乙烯胺(Lupamin)作为毛细管内壁的修饰剂,成功地用于多肽及蛋白质毛细管电动分离分析[1]。Lupamin修饰的毛细管不仅能产生足够强度的阳极方向电渗流,而且能拟制样品吸附、提高分离选择性及检测灵敏度。本文第一部分内容将报告Lupamin修饰的毛细管在毛细管电动分离中的一些基本特性,以及部分多肽及蛋白质样品的毛细管电泳、电色谱分离行为。
电喷雾离子化-质谱(ESI-MS)是毛细管电泳分离中的一种高灵敏度检测技术,与分离技术相结合不仅能给出色谱保留信息,而且能给出第二维分子量和结构信息,对被分离组分同时进行结构鉴定具有独特的优势。本文第二部分将介绍本课题组开发的一种无鞘流纳流电喷雾界面装置及其在氨基酸、多肽的CE/CEC-ESI-MS分析中的应用[2]。
具有相同次序(Sequence)不同氨基酸组成的多肽的分离与鉴定是多肽分离分析中具有挑战性的课题之一。本文第三部分内容将介绍本课题组最近采用胶束毛细管电动色谱(MEKC)及反相液相色谱-电喷雾离子化-质谱(RPLC-ESI-MS)为手段,以具有相同次序(Sequence)不同氨基酸组成的多肽为分离与鉴定对象,所取得的一些新进展。
谢辞:本课题得到国家自然科学基金 (NO.20775055) 和武汉大学珞珈学者特聘教授启动基金(No. 306276216)的资助,特此致谢。
参考文献
1. Yue Wu, Jun Xue, Fang Wang, Zilin Chen*, Journal of Separation Science, 2008, in press .
2. Zilin Chen*, Bill Boggess and Hsueh-Chia Chang, Journal of Mass Spectrometry, 2007, 42:244-253