色谱与波谱技术在药物分析应用中的新进展
                          侯陆星1,2，蔡光明1，黄媛1
1．解放军第302医院 全军中药研究所，北京 100039；2．首都师范大学化学系，北京 100037
关键词:药物分析；应用；色谱技术；波谱技术
    现代药物分析就是要选择合适的分离与分析方法不仅对药品生产、贮藏过程以及使用部门的临床药物分析等进行静态质量控制，同时也要对药物生物体内和代谢过程进行综合评价和动态分析研究，保证药物有严格的质量标准和科学合理的质量控制方法。色谱与波谱技术的发展为此做出了重要贡献。
1.高效液相色谱法
    高效液相色谱法(High-Performance Liquid Chromatography, HPLC)灵敏度高、选择性好，可分析微量组分甚至痕量样品，在医药分析领域应用最广、发展最快。近年，HPLC在检测器、固定相等方面快速发展；色谱衍生化和色谱联用技术更加成熟，在中药指纹图谱、医学诊断、临床生物样品分析、军用化学毒剂分析等方面得到了广泛应用。Nikolaos C等[ ]采用一种新的HPLC-ELSD法，对药品、血清和尿中的托普霉素含量进行了直接测定。2004年Waters推出世界上第一个商品化的超高效液相色谱系统(UPLCTM )产品Waters ACQUITY Ultra Performance LCTM[ ]。UPLC的出现大大改善了液相色谱的分离度、样品通量和灵敏度。

2.气相色谱法
    气相色谱（Gas Chromatography, GC）在药物分析方面的应用达到近1/3。电子程序压力流量控制系统技术（EPC）已作为气相色谱仪的基本配置，新的高选择性固定液，新细内径毛细管色谱柱等的广泛应用为色谱条件的再现、优化和自动化提供了更可靠更完善的支持。快速色谱、多维色谱发展迅速，全二维气相色谱受到重视。利用新型气相色谱—表面声波传感器 (GC／SAW)等联用技术，可以得到更加准确、可靠的定性和定量结果。气相色谱尤其在中药中挥发性成分的分析等方面的应用更加广

3. 毛细管电泳
    毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)具有分析时间短、分离效率高、检测限度低、进样量少、溶剂消耗少、自动化程度高和运转费用低等优点。广泛应用于化学药品的含量测定以及质量控制。同时运用CE对生物碱、黄酮类、皂苷类等活性成分进行分离分析；建立了川芎、银杏叶、甘草、人参、西洋参等多种中药材及其制剂的中药指纹图谱；在生物制品、手性分离、相互作用、药物代谢、抗癌金属药物、天然产物等研究领域也开展了大量的工作。近年来毛细管电泳—质谱联用、毛细管电色谱、微芯片毛细管电泳等新型分析技术发展迅速。
4.薄层色谱法
    2005年版《中国药典》采用薄层色谱法进行鉴别和含量测定的药品数量由95版的530种增加到2064种[ ]。利用TLC研究指纹图谱，包括薄层图像指纹图谱、薄层扫描指纹图谱、棒状薄层色谱仪联用中药指纹图谱等已经被国内外学者所接受。H. Agrawal等 [ ]利用HPTLC和PC-SFC联用技术对玄参红酸A和B进行了分离和含量测定。
5.色谱联用技术
    色谱联用技术集成了色谱的高分离能力和光谱结构鉴定高灵敏度和极强的定性专属特性于一体, 成为药物研究中不可或缺的有效工具。目前快速发展并广泛应用的色谱联用技术包括气相色谱-质谱(GC-MS)、液相色谱-质谱(LC-MS)、高效液相- 核磁共振仪(HPLC-NMR)、毛细管电泳-核磁共振仪(CE- NMR)、液相色谱- 质谱/质谱(LC- MS-MS)、液相色谱-核磁-质谱(LC-NMR-MS)、毛细管电泳- 质谱(CE- MS)等。
6．其它分析方法
    红外光谱特征性强、取样量小、简便、迅速、无损，与化学计量学方法结合，对于中药材的鉴别和药物质量的全面控制有着重要的意义。电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES) 作为微量元素检测中常用方法之一, 分析速度快, 灵敏度高, 干扰少, 线性范围宽。电化学发光分析技术在微量及痕量元素、酶分析、免疫分析、核酸、药物代谢动力学研究和临床药理及药效分析等领域受到广泛关注。荧光分析选择性高、信息量丰富、检测限低、线性范围宽，灵敏度比分光光度法高2-4个数量级。超临界流体色谱谱(Supercritical Fluid Chromatography，SFC)结合了气相色谱的高速度、高效以及高效液相色谱的选择性强、分离效能高等特点，被用于分析、难挥发、易热解高分子物质，另外，SFC检测方式和固定相也日益多样化。在手性分离方面应用也日益广泛。此外， X衍射射线法、旋光分析法、核磁共振法、热分析法、手性药物拆分技术、表面等离子体谐振、固相萃取、微透析技术等也有大量文献报道应用于药物分析。
7．结语
    由色谱与波谱理论衍生的新方法、新技术近年来发展迅速，在药物分析中已得到广泛应用,它具有可简便、快速地从复杂介质的样品中,灵敏、可靠地检测一些微量（痕量）药物成分，确保药物的安全、有效和质量可控。随着电子与生物科学技术的发展，各种联用技术，新的仪器设备和新的技术、方法的发展将会更加迅速，以求适应药物科学发展的需要。
参考文献：

[ ]Nikolaos C M , Michael A K. Development and validation of a novel HPLC/ELSD method for the direct determination of tobramycin in pharmaceuticals, plasma ,andurine[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2005, 382(2):290-296.
[ ]Waters公司北京实验室.Waters ACQUITY UPLCTM介绍[J].环境化学,2004, 23 (5):606-611.
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[ ]Agrawal H, Kaul N, Paradkar A. R , et al. Standardization of Crude Extract of Neem Seed Kernels (Azadirachta indica A. Juss) and Commercial Neem Based Formulations Using HPTLC and Extended Length Packed-Columns SFC Method [J].Chromatographia. 2005, 62(3-4):183-195.
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